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    Label free蛋白质组学非标记定量技术

    技术简介:

           Label-free通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析定量,不需要对比较样本做特定标记处理,只需要比较特定肽段/蛋白在不同样品间的色谱质谱响应信号便可得到样品间蛋白表达量的变化,通常用于分析大规模蛋白鉴定和定量时所产生的质谱数据。该技术可分为基于谱图数(Spectra Count,简称SC)和基于肽段母离子强度(或色谱离子流的峰面积即XIC)两种方法,后者更准确,使用更广泛。Label-free技术对液相色谱串联质谱的稳定性和重复性要求较高,但无需昂贵的同位素标签做标记。
      与iTRAQ技术相比,Label-free的技术优势就在于蛋白质不需要昂贵的同位素标签进行标记,所需样品总量少,耗费低。

     

    技术流程:

    http://www.abace-biology.com/Images/Label-free-1.jpg

     

    技术特点:

    1.       无标记——无需昂贵的同位素标签做内标,实验耗费低;

    2.       定量方法——基于信息分析进行差异蛋白定量

    3.       仪器要求高——对液相色谱串联质谱的稳定性和重复性要求较高;

    4.       数据要求高——对样本的操作较少,并且不受样品条件的限制,克服了标记定量技术在对多个样本进行定量方面的缺陷;

    5.       数据量大——可以检测到的肽段的动态范围可以达到4个数量级以上,提高了低丰度蛋白质的检测效率和非标记定量准确性。

     

    应用领域:

    ·         机理和调控机制研究

    ·         动态过程中机制研究

    ·         疾病标志物筛选

    ·         用药及预后标志物筛选